HPLC法对黄柏不同期采收药材不同部位的小檗碱含量比较研究
A Comparative Study on Determination
of Berberine in Phellodendron Bark
from Different Region and Different Time With HPLC

宋兵双¹，谢昭明²
(1.湖南正清制药集团股份有限公司，湖南怀化418000；
2.湖南省中医药研究院中药研究所，湖南长沙410013)

　　关键词：黄柏；含量测定；高效液相色谱法

　　黄柏药材一般来源于干皮和根皮，但生长年限较长或较粗大的树枝的枝皮亦可入药，并常有混杂。质量较差的黄柏药材多为生长年限短的黄柏根皮、干皮或生长年限长的黄柏上部干皮或枝皮。根皮、下部干皮中小檗碱含量较高，5月份采收比8月份采收含量明显增加，因此，应注意黄柏药材的来源部位和采收期。作为提取黄连素的原料，最好的提取原料为川黄柏的根皮，以生长年限长的黄柏树5月份采收为佳。
1　实验部分
1.1　仪器与试药
　　高效液相色谱法：岛津LC－6A、C－R3A数据处理机、SPD－6A紫外可见检测器。岛津Shim－pack CLC－phenyl (10μm，6.0mm×150mm)色谱柱。乙腈∶色谱纯。其他试剂均为分析纯。盐酸小檗碱对照品：中国药品生物制品检定所提供，纯度不低于99.0％。黄柏药材经湖南省中医药研究院中药所鉴定为川黄柏。
1.2　方法与结果
1.2.1　色谱条件　流动相：乙腈∶水(0.05mol/LNaH₂PO₄,H₃PO₄调PH3.5)=40∶60。检测波长：345nm。流速：1.5ml/min。灵敏度：0.16AUFS。衰减：ATTEN=4。柱温：室温。
1.2.2　线性关系的考察　取干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品约6mg，精密称定，置150ml容量瓶中，加50％乙醇至刻度。分别精密吸取0、2.00、4.00、6.00、8.00ml至10ml容量瓶中，加50％乙醇稀释至刻度，摇匀，及对照品溶液原液，按上述色谱条件，分别精密吸取10μl，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积积分值(Y)对盐酸小檗碱浓度(X)作回归方程为：Y=10873.15X＋1720.31，r=0.9994，线性范围为7.73～38.66μg/ml。
1.2.3　样品测定　取黄柏药材细粉(过80目筛)约0.1g，精密称定，置100ml容量瓶中，加50％乙醇至刻度，超声提取40min(10，10，10，10)，滤过，弃去初滤液20ml，收集续滤液作为供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以外标两点法计算，结果见附表。

附表　不同期采收黄柏药材不同部位的盐酸小檗碱含量比较(％)

2　小结与讨论
　　黄柏、杜仲、厚朴为三大林木药材，黄柏为速生树种，不择土壤、气候条件，因而得到大规模地种植，现已供过于求，黄柏作为黄连素的提取原料，比从小檗中提取具有明显优势，小檗类植物因长期作为黄连素的提取原料，资源日益枯竭，而黄柏树皮资源丰富，供大于求，价格低廉，急需寻找出路，黄柏提取黄连素不会破坏资源，可为广大药农增收，但由于黄连素目前价格较低，黄柏中提取黄连素，要求黄柏树皮中盐酸小檗碱含量>3％，因此，如何选购黄柏树皮原料尤其重要，研究结果表明，10年生黄柏根皮、下部干皮以5月份采收为最佳提取原料，树皮的含量比干皮高50％以上，同时，作为黄柏药材入药，亦应注意其药材质量。
参考文献
〔1〕王义明.黄柏及中成药中小檗碱和巴马亭的高效液相色谱法测定.药学学报，1989，24(4)：275
〔2〕王静竹.高效液相色谱法对黄柏炮制品的研究.中草药，1994，25(6)：293
〔3〕赵陆华.HPLC法测定黄连、黄柏及其中成药中小檗碱型生物碱的含量.中国药科大学学报，1989，20(2)：82
〔4〕张承忠.马尾连、黄连和黄柏中小檗碱的HPLC法测定比较.中草药，1986，17(2)：16

(收稿日期：1999－10－13)